LITMIR.BIZ

      На втором этапе реакции в каждую пробирку вносят гемсистему, и после перемешивания пробирки вновь помещают в термостат на то же время, а затем учитывают результаты РСК.

      Интенсивность реакции отмечается плюсами: «++++» – полная задержка гемолиза, жидкость в пробирке бесцветна, все эритроциты оседают на дно (резко положительная РСК); «+++», «++» – слабый гемолиз, уменьшенное количество эритроцитов в осадке (положительные РСК); «+» – выраженный гемолиз, жидкость окрашена в розовый цвет, незначительное количество эритроцитов в осадке (слабоположительная РСК). Отрицательная РСК обозначается знаком «-». При этом наблюдается полный гемолиз, жидкость в пробирке имеет цвет алой, или «лаковой», крови.

      Чувствительность РСК повышается, если связывание комплемента проводить на холоде при температуре 4 °C в течение 18–20 ч. В такой модификации РСК используется в диагностике вирусных инфекционных болезней. Антигены из высоковирулентных вирусов инактивируют добавлением слабых концентраций формалина (1:500-1:1000) или УФ-облучением.

      Несмотря на сложность постановки РСК нашла широкое применение в диагностике хронической формы гонореи, коклюша, актиномикоза, всех риккетсиозов и вирусных инфекций.

      Реакции с использованием меченых антител

      Мечеными называются антитела, связанные с индифферентными для них веществами, которые, не изменяя их специфичности и антигенной структуры, придают иммуноглобулинам характерные свойства, что облегчает идентификацию антигенов в иммунных комплексах.

      Наибольшее распространение как «метки» получили: 1) флюорохромы, в частности флюоресцеинизотиоцианат (ФИТЦ) – в реакциях иммунофлюоресценции (РИФ) и антикомплементарной РИФ; 2) железосодержащий белок ферритин – в иммуноэлектронной микроскопии вирусов и бактерий (иммуноферритиновая реакция); 3) ферменты (чаще перокси-даза) – для проведения иммуноферментного анализа (ИФА); 4) радиоактивные изотопы (¹²⁵J) – для радиоиммунного анализа (РИА). Надо отметить, что в этих реакциях вместо антител метятся также антигены (рис. 8).

      Рис. 8. Серологические реакции с использованием меченых антител: Аг – антиген; Ig – иммунная сыворотка

      Серологические реакции с использованием меченых антител прочно вошли в практику экспресс-диагностики вирусных и бактериальных инфекций, широко применяются в идентификации и дифференциации антигенов микробного, животного и растительного происхождения.

      Реакции иммунофлюоресценции

      Имеются два варианта постановки РИФ (реакции Кунса) – прямая и непрямая реакции иммунофлюоресценции.

      Прямая РИФ – простая одноэтапная реакция, но так как для ее выполнения требуется наличие большого количества меченных антимикробных сывороток, то ставится она реже непрямой, постановка которой

Скачать книгу